وصمة نورذن Northern Blot

طريقة تستعمل للكشف عن RNA وخاصة mRNA التي يتم فصلها من جناسات Homogenates الخلايا او الأنسجة . وللطريقة استعمالات وتطبيقات كثيرة منها الكشف عن زيادة التعبير عن جينات السرطان Oncogenes ، وقلة التعبير عن الجينات المحبطة للأورام Tumor Suppressor Genes في حالات السرطان . فضلا عن استعمالها لدراسة تأثير المواد الدوائية والغذائية في التعبير الجيني .
وتتم الطريقة بفصل واستخلاص جزيئات RNA من نماذج الأنسجة او غيرها من المصادر باستعمال تقنيات خاصة مثل Cellulose Chromatography وذلك لفصل جزيئات mRNA التي تكون حاوية على Poly(A) Tail عن الجزيئات الأخرى ، ثم تفصل الجزيئات على هلام الترحيل الكهربائي بالاعتماد على حجم الجزيئات ويفضل ان يحوي هلام الفصل على بعض المواد الماسخة مثل الفورمالديهايد او تراكيز عالية من اليوريا للتقليل من تكون التراكيب الثانوية التي تميل جزيئات RNA لتكوينها .
ويتم الفصل عادة بوجود معاملة ضابطة تحوي على قطع من RNA معروفة الحجم ( RNA Ladder) . ثم تنقل جزيئات RNA إلى أغشية خاصة وأفضلها أغشية نايلون موجبة الشحنة لتسهيل ارتباط جزيئات RNA السالبة الشحنة ، ثم تثبت على الأغشية بالمعاملة بالأشعة فوق البنفسجية او الحرارة ، وتغسل الأغشية لإزالة الفائض من الجزيئات ، ثم يتم تهجينها مع جزيئات معلمة بالفسفور المشع p32 او مقرونة بإنزيمات الإعلان وهي Alkaline Phosphatase او Horseradish Peroxidase . والمجسات المستعملة RNA Probes تكون حاوية على توالي محدد مكمل لبعض تواليات القطع المراد الكشف عنها ، واقل عدد من هذه التواليات يكون بحدود 25 قاعدة لانها يمكن ان تقاوم عمل التجربة . ثم يتم الكشف عنها اما باستعمال أفلام الأشعة السينية في حالة استعمال المواد المشعة ، او التقدير اللوني في حالة الإنزيمات او أي طريقة أخرى تلاؤم عملية التوسيم التي تمت على المجسات .

اخر الاخبار

اخبار العتبة العباسية المقدسة

قسم الشؤون الدينية يُطلق دورة فقهية دينية لملاكات مستشفى الكفيل

شعبة فاطمة بنت أسد للدراسات القرآنية تعلن نتائج مسابقة (ميثاق الرسول)

شعبة الخطابة الحسينية النسوية تنظّم مسابقة فرقية لطالبات برنامج ثمار العطاء

قسم العلاقات ينظم ورشة عن فن الإقناع والتواصل الفعّال للطلبة المنسقين

المزيد

الآخبار الصحية

تغيير بسيط في نمط التفكير قد يحدث فرقا كبيرا لصحة الدماغ ؟

لماذا ينعشنا المشروب الساخن في الطقس الحار؟

علماء يكتشفون فئة دم فريدة من نوعها في العالم !

لماذا ينصح الأطباء بزيت الزيتون يوميا؟

المزيد

الآخبار التكنلوجية

حساس الإطارات.. ما هو وعلامات تلفه وكيفية صيانته؟

ما معنى أودي Quattro؟ سر الأداء والتميز الهندسي ؟!

فصل الشاحن أم الهاتف أولا؟.. عادات بسيطة تطيل عمر البطارية

تعود للقرن الرابع قبل الميلاد.. اكتشاف بقايا "إيمت" المصرية

المزيد

مواضيع ذات صلة

Targeting of Mitochondrial Proteins

Intra-Golgi Transport and Protein Processing

Cotranslational Protein Translocation Into the Endoplasmic Reticulum

The Isolation and Structure of Operator

The Migration Retardation Assay and DNA Looping

Repressor Binds to DNA: The Operator is DNA

Detection and Purification of lac Repressor

The Difficulty of Detecting Wild-Type lac Repressor

An Assay for lac Repressor

Proving lac Repressor is a Protein

The Role of Inducer Analogs in the Study of the lac Operon

Background of the lac Operon