وصمة نورذن Northern Blot

طريقة تستعمل للكشف عن RNA وخاصة mRNA التي يتم فصلها من جناسات Homogenates الخلايا او الأنسجة . وللطريقة استعمالات وتطبيقات كثيرة منها الكشف عن زيادة التعبير عن جينات السرطان Oncogenes ، وقلة التعبير عن الجينات المحبطة للأورام Tumor Suppressor Genes في حالات السرطان . فضلا عن استعمالها لدراسة تأثير المواد الدوائية والغذائية في التعبير الجيني .
وتتم الطريقة بفصل واستخلاص جزيئات RNA من نماذج الأنسجة او غيرها من المصادر باستعمال تقنيات خاصة مثل Cellulose Chromatography وذلك لفصل جزيئات mRNA التي تكون حاوية على Poly(A) Tail عن الجزيئات الأخرى ، ثم تفصل الجزيئات على هلام الترحيل الكهربائي بالاعتماد على حجم الجزيئات ويفضل ان يحوي هلام الفصل على بعض المواد الماسخة مثل الفورمالديهايد او تراكيز عالية من اليوريا للتقليل من تكون التراكيب الثانوية التي تميل جزيئات RNA لتكوينها .
ويتم الفصل عادة بوجود معاملة ضابطة تحوي على قطع من RNA معروفة الحجم ( RNA Ladder) . ثم تنقل جزيئات RNA إلى أغشية خاصة وأفضلها أغشية نايلون موجبة الشحنة لتسهيل ارتباط جزيئات RNA السالبة الشحنة ، ثم تثبت على الأغشية بالمعاملة بالأشعة فوق البنفسجية او الحرارة ، وتغسل الأغشية لإزالة الفائض من الجزيئات ، ثم يتم تهجينها مع جزيئات معلمة بالفسفور المشع p32 او مقرونة بإنزيمات الإعلان وهي Alkaline Phosphatase او Horseradish Peroxidase . والمجسات المستعملة RNA Probes تكون حاوية على توالي محدد مكمل لبعض تواليات القطع المراد الكشف عنها ، واقل عدد من هذه التواليات يكون بحدود 25 قاعدة لانها يمكن ان تقاوم عمل التجربة . ثم يتم الكشف عنها اما باستعمال أفلام الأشعة السينية في حالة استعمال المواد المشعة ، او التقدير اللوني في حالة الإنزيمات او أي طريقة أخرى تلاؤم عملية التوسيم التي تمت على المجسات .