علم الكيمياء
تاريخ الكيمياء والعلماء المشاهير
التحاضير والتجارب الكيميائية
المخاطر والوقاية في الكيمياء
اخرى
مقالات متنوعة في علم الكيمياء
كيمياء عامة
الكيمياء التحليلية
مواضيع عامة في الكيمياء التحليلية
التحليل النوعي والكمي
التحليل الآلي (الطيفي)
طرق الفصل والتنقية
الكيمياء الحياتية
مواضيع عامة في الكيمياء الحياتية
الكاربوهيدرات
الاحماض الامينية والبروتينات
الانزيمات
الدهون
الاحماض النووية
الفيتامينات والمرافقات الانزيمية
الهرمونات
الكيمياء العضوية
مواضيع عامة في الكيمياء العضوية
الهايدروكاربونات
المركبات الوسطية وميكانيكيات التفاعلات العضوية
التشخيص العضوي
تجارب وتفاعلات في الكيمياء العضوية
الكيمياء الفيزيائية
مواضيع عامة في الكيمياء الفيزيائية
الكيمياء الحرارية
حركية التفاعلات الكيميائية
الكيمياء الكهربائية
الكيمياء اللاعضوية
مواضيع عامة في الكيمياء اللاعضوية
الجدول الدوري وخواص العناصر
نظريات التآصر الكيميائي
كيمياء العناصر الانتقالية ومركباتها المعقدة
مواضيع اخرى في الكيمياء
كيمياء النانو
الكيمياء السريرية
الكيمياء الطبية والدوائية
كيمياء الاغذية والنواتج الطبيعية
الكيمياء الجنائية
الكيمياء الصناعية
البترو كيمياويات
الكيمياء الخضراء
كيمياء البيئة
كيمياء البوليمرات
مواضيع عامة في الكيمياء الصناعية
الكيمياء الاشعاعية والنووية
كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي Gel- filtration chromatography
المؤلف: د. طارق يونس احمد / د. لؤي عبد علي الهلالي
المصدر: الكيمياء الحياتية
الجزء والصفحة: ج 1 ص 387
2023-11-29
1641
يتضمن كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي فصل المركبات عن بعضها استناداً الى الاختلاف في الحجم والوزن الجزيئي عند إمرارها من خلال العمود الحاوي على حبيبات ذات مسامية معينة منتفخة متراصة (محبة للماء) تدعى الهلام (جيل) Gel مثل هلام الديكستران Dextran ( السيفاديكس Sephadex أو الأكاروز Agarose) والتي هي عبارة عن مشتقات لمتعدد السكريات أو يمكن استخدام هلام بايوجيـل Boi-gel الذي هو مشتقات متعدد أكرايل أميد Polyacrylamide وتحضر جميعاً بدرجات مختلفة من المسامية. فالجزيئات الكبيرة لا تستطيع اختراق ثقوب حبيبات الهلام المنتفخة وإنما تمر من خارج الحبيبات فتخرج من العمود مع السائل الراشح (الروغان) Elute أولاً حيث يمكن فصلها وجمعها بوساطة جهاز جامع الأجزاء التلقائي Fractions Collector ويجمع بشكل أنابيب صغيرة ومتسلسلة، اما الجزيئات الصغيرة فأنها تخترق حبيبات الهلام فتخرج من العمود مع السائل المترشح ثانياً الشكل (14-13). وبهذه الطريقة يمكن فصل مزيج من الببتيدات أو البروتينات استناداً الى الاختلاف في الحجم والوزن الجزيئي فضلاً عن. ذلك فأن حبيبات الترشيح الهلامي تعمل غربالاً جزيئياً يمكن من خلاله فصل البروتينات عن الأملاح مثل كبريتات الأمونيوم المتحدة بها بفترات زمنية متلاحقة إذ يعتبر الترشيح الهلامي احد الطرائق المهمة المستعملة كثيراً لفصل البروتينات عن الأملاح Desalting
الشكل (14-13) يلاحظ في تقنية كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي ان مزيج من البروتينات الصغيرة تمر من داخل حبيبات الهلام بينما البروتينات الكبيرة لا تستطيع ان تمر من الداخل لذلك سوف تمر من محيط الحبيبات وتجتاز بشكل أسرع من البروتينات الصغيرة بحيث يكون ترتيب النزول خلال حجم
الروغان في البدء الكبيرة ثم متوسطة الحجم ثم الصغيرة.
استخدامات كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي
1- فصل المركبات ذات الحجوم والأوزان الجزيئية المختلفة.
2- تنقية المركبات.
3 عزل المركبات وتقدير كمياتها في المزيج.
4- إيجاد الأوزان الجزيئية للمركبات المفصولة بالمقارنة مع مركبات ذات أوزان جزيئية معروفة من
خلال رسم الأوزان الجزيئية المعروفة مقابل لوغاريتم حجوم روغانها في عمود الفصل.
وفي ما يأتي الجدول ( 3-13) يوضح أنواع الهلام المستخدم في هذه التقنية ومدى الوزن الجزيئي الذي يمكن فصله:
*مدى التجزئة Exclusion limit: يعرف بأنه الوزن الجزيئي للمركب الذي لا يدخل في الثقوب علـى سطح حبيبات الهلام.
**إن الأرقام بعد الحرف G (.........15,10) تمثل كمية الماء الممتص حين وضع حبيبات الهلام الجافة في الماء ويقاس بوحدة (mL/g ) وإن 10- G يمتلك أعلى كمية من التأصر الجسري Cross linking للديكستران.