تقنية المصفوفات المجهرية – الجزء العملي Microarray technology

البروتوكول العملي لتحضير المصفوفات المجهرية

تشمل الاجزاء الرئيسية لعملية تحضير المصفوفات المجهرية الآتي

• — الرنا RNA

- تجري التجارب باستخدام الرنا الكلي total RNA او الرنا المرسال mRNA حيث يتم اجراء عملية العزل والاستخلاص والتقنية .

- تجمع عينتان من الرنا الكلي او المرسال او اكثر لغرض مقارنة مستويات التعبير الجيني .

• — المصفوفة the array

- تستخدم الشرائح الزجاجية او الاغشية membranes حيث تضاف البقع spots الممثلة للجينات او نسق القراءة المفتوح open reading frame (ORF) على سطوح هذه الشرائح الزجاجية او الاغشية .

• — المجسات probes

- يحضر الدنا المتممة او المكملة الموسومة بصبغة او اثر تفلوري Fluorescently Jabeled c-DNA من نماذج الرنا RNA المعزول بتقنية الاستنساخ العكسي  Reverse transcription . اما تجمعات RNA المطلوب مقارنتها فيتم وسمها بمؤشرات  متفلورة مختلفة .

• — التهجين the hybridization

- تجري عملية التهجين بين المجسات probes والمصفوفة array

• — المسح the scan

- تغسل المصفوفة للتخلص من المجسات غير النوعية والتي لم تتهجن ثم تخضع المصفوفة للمسح ولمرتين ثم تمسح بالليزرات lasers النوعية للفلروسنت للمؤشر المستخدم .

- الـ c-DNA الموسوم بالصبغة المتفلورة سوف يضيء البقعة التي تهجن فيها مع المجس .

— التحليل the analysis

- يمكن قياس شدة التفلور fluorescent intensities  من كلا الصورتين التي تم مسحهما . وتستخدم النسبة بين الشدتين لتحديد الجيني النسبي بين هاتين المجموعتين من الخلايا

• — الاجهزة

تستخدم اجهزة متطورة لتصنيع المصفوفات المجهرية والتي تسمى بالـ arrayer  (الشكل 1) (a) و (الشكل 1) (b)

الشكل ( a  1) : المؤلف الى جانب وحدة تصنيع المصفوفات المجهرية Microarray

الشكل (b 1) : جهاز تصنيع المصفوفات المجهرية من انتاج شركة  BioRad

مواضيع ذات صلة

البيروكسيديز الحاوي على المنغنيز Manganese Peroxidase

تكاملية الاجهزة الاحيائية

الاجهزة العصبونية ونقاط التشابك العصبية

الاجهزة الجزيئية الفاعلة ومفهوم حياة الاعضاء الحية

مشكلة تقنية السليكون

الحواسيب المعتمدة على البروتينات

حاسوب الدنا DNA COMPUTER

بروتوكول تحضير شرائح Poly-L-lysine لتصنيع المصفوفة المجهرية

تطبيقات تقنية مصفوفة الـ DNA

بروتوكول لتحضير مصفوفة مجهرية لقليلات النيوكليوتيدات Oligonucleotides

الحجم والوظيفة للمصفوفات المجهرية

ماهية المصفوفة المجهرية What is a microarray