الزيادة في تركيز الإنزيم الذي تبدأ من قيم منخفضة تسبب ارتفاع نسبي في نشاط الإنزيم لكن تركيز المادة الأساس المرتفع يساعد على وصول سرعة نشاط الإنزيم إلى القيمة القصوى الذي عند زيادة التركيز فوق تلك القيمة لا يسبب أي زيادة في نشاط الإنزيم بالرغم من الزيادة التي تحصل في تركيز الإنزيم ويمكن توضيح ذلك من المنحني الذي يحصل عليه من العلاقة بين سرعة التفاعلات الإنزيمية وتركيز المادة الأساس (الشكل1) في تراكيز منخفضة للمادة الأساس فأن جميع جزيئات الإنزيم لا تتشبع بجزيئات المادة الأساس، عند زيادة تركيز المادة الأساس، فأن عدد كبير من جزيئات الإنزيم تبدأ بالتفاعل مع المادة الأساس، لذلك فأن سرعة عمل الإنزيم تزداد تدريجيا، يمكن الحصول على سرعة التفاعل الإنزيمي V لتفاعل المادة الأساس المنفرد في تركيز المادة الأساس يحصل علية من معادلة ميكيليس - منتن. v =V[S] / Km +[S] or Km=[S] x (V/v-1) حيث أن V هي أقصى سرعة تفاعل أنزيمي. هي سرعة التفاعل الإنزيمي [S] هي تركيز الإنزيم في مول التر Kmهي ثابت ميكيليس ثابت ميكيليس هو تركيز الإنزيم في المولات لكل لتر الذي فيه يحافظ على نصف السرعة القصوى، الإنزيم الذي يعمل على عدة مواد أساس فأن تقدير ثابت ميكليس للمواد الأساس المختلفة يساعد في مقارنة ألفة الإنزيم لتلك المواد الأساسية المختلفة، ارتفاع قيمة ثابت ميكيليس للمادة الأساس يخفض من ألفة الإنزيم لتلك المادة الأساس كما أن ثابت ميكيليس يثل ثابت تفكك التفاعلات العكسية المحفزة بالإنزيمات والذي لا يتأثر بواسطة تركيز الإنزيم العوامل التي يمكن أن تؤثر على ارتباط الإنزيم والمادة الأساس بالإضافة إلى سرعة التفاعلات الأمامية والخلفية هي الأس الهيدروجيني درجة الحرارة، القوة الايونية وبعض المثبطات وتلك العوامل ها تأثير على ثابت ميكيليس ويقدر ثابت ميكليس بيانيا من double reciprocal أو من رسم line weaver Burke plot حيث يكون خط مستقيم والذي يحصل عليه من 1/V و [S]/1 فالعمود على الخط المستقيم يعطي مقلوب السرعة القصوى 1/V والخط الأفقي عليه يعطي القيمة السالبة لمقلوب ثابت ميكيليس Km/1- وانحدار الخط يعطي Km/V وبعض الأحيان يستعمل تعبير Vm بدلا من V لتمثيل السرعة القصوى بينما في التفاعلات ثنائية المواد الأساس أو ما يطلق عليها الإزاحة المنفردة single displacement فأنه يمكن تحوير معادلة ثابت ميكيليس كالاتي: V = Vm / Ks1 Km1 / [S1][S2] + Km1 / [S1] + Km2 / [S2] + 1 حيث أن ₁KS هو ثابت تفكك ثابت المادة الأساس لمعقد المادة الأساس - الإنزيم من المادة الأساس (1S) الذي يرتبط أولا مع الإنزيم [S2] [S1] هي تراكيز المادتين الأساسية بينما Km1 Km2 مثل ثوابت ميكيليس، حيث أن KS يعطى بواسطة التعبير [E] [S1] / [ES1] أما في تفاعلات ثنائية المادة الأساس لكرة المنضدة فانه يمكن افتراض أن معادلة ميكيليس - منتن كالأتي: