الغرض من الاختبار Purpose

يستعمل هذا الاختبار لتحديد تأثير Optochin Ethyl hydrocupreine hydrochloride ) ) على البكتيريا . يقوم Optochin بتحلل بكتيريا المكورات الرئوية pneumococci (موجبة للاختبار) ، في حين تكون مكورات الفا العقدية alpha-streptococci مقاومة ( سالبة للاختبار).

مبدأ الاختبار Principle

يتداخل مضاد Optochin مع ATPase وينتج أدينوسين ثلاثي الفوسفات (ATP) في البكتيريا. يوضع قرص (Optochin) المشبع (TaxoP) على طبقة من البكتيريا النامية على اطباق اكار الدم، بالشكل يسمح للمضاد الحيوي بالانتشار خلال الوسط الزرعي. يثبط المضاد الحيوي نمو البكتيريا الحساسة مكونا بذلك منطقة تثبيط zone شفافة حول القرص . يعد قطر المنطقة المثبطة من ( 14-16) ملم حساسة ويعد اختبار Optochin تخميني لبكتيريا .Streptococcus pneumoniae

طريقة العمل Method

1- تلقح اطباق من اكار الدم الحاوي ( 5 %) sheep blood باثنان الى ثلاث مستعمرات من مزرعة نقية ، باستعمال ناقل معدني Loop بطريقة التخطيط

2- يوضع قرص المضاد الحيوي Optochin في الثلث العلوي من المنطقة المخططة في الطبق ، باستعمال ملقط معقم و يضغط برفق على القرص للتأكد من اتصال القرص مع سطح الوسط.

3- يحضن الطبق لمدة (18- 24 ) ساعة بدرجة حرارة (35) م في ظروف ( 5%) من Co2

4- تقاس منطقة التثبيط بالملليمترات مع قطر القرص.

النتائج المتوقعة Expected Results

* النتيجة الموجبة : منطقة تثبيط بقطر ( ≥ 14 ملم ) لقرص بقطر (6 ملم ) الشكل ( A-48 )

* النتيجة السالبة : عدم وجود منطقة تثبيط . الشكل ( B-48 )

الملاحظات :

1- النتيجة غير الدقيقة المشكوك بها اذا تكون منطقة التثبيط اقل من (14) ملم  للمكورات الرئوية، لذا يثبت تشخيص سلالة المكورات الرئوية بوساطة اختبار bile-solubility test الموجب النتيجة.

 2- عدم حضن الاطباق في حاضنة هوائية لتلافي حدوث مناطق تثبيط أوسع.